ساخت نانو زیست حسگر الکتروشیمیایی برای تشخیص روتا ویروس‌ها
پژوهشگران گروه ویروس شناسی دانشکده علوم پزشکی تربیت مدرس موفق به طراحی و ساخت نانو زیست حسگر الکتروشیمیایی مبتنی بر هیبریداسیون DNA برای تشخیص روتا ویروس‌ها در کشت سلول آلوده به ویروس و نمونه‌های بالینی شدند.
به گزارش گروه دانشگاه خبرگزاری فارس به نقل از روابط عمومی دانشگاه تربیت مدرس، روتاویروس‌ها عامل اصلی ایجاد گاستروانتریت حاد در کودکان زیر ۵ سال هستند، روش‌های تشخیصی متنوعی از جمله استفاده از میکروسکوپ الکترونی، روش ELISA،PAGE و RT-PCR برای تشخیص روتاویروس‌ها وجود دارد که از این میان، روش های RT-PCR به عنوان روش استاندارد طلایی تشخیص در آزمایشگاه‌های تشخیص طبی مورد استفاده قرار می‌گیرد. کیانا کتابی پژوهشگر گروه ویروس‌شناسی دانشکده علوم پزشکی که این پژوهش در قالب رساله دکترای تخصصی وی در رشته ویروس شناسی انجام شده است، با بیان این مقدمه درباره ضرورت این تحقیق گفت: به دلیل هزینه بالای این تکنیک‌ها و گاهی در دسترس نبودن کیت‌های تجاری در امر تشخیص و همچنین بررسی میزان همه‌گیری این بیماری، به کار بردن روش‌های غیر وابسته به PCR مثل طراحی یک حسگر زیستی تشخیصی، ضروری به نظر می‌رسد. وی افزود: در این مطالعه پس از سنتز نانوساختارهای MXene از فاز MAX و انجام مشخصه یابی‌های FESEM، AFM،EDX و XRD روی آن‌ها، یک DNA زیست حسگر الکتروشیمیایی لیبل دار اصلاح شده با پلی پیرول، HEMA، DMPP و نانوساختارهای MXene و دارای لایه‌ای از نانوذرات طلا روی آن تهیه شد. همچنین پروب مکمل توالی محافظت شده‌ای از پروتئین 6VP روتاویروس‌ها برای شناسایی این ویروس در نمونه مورد نظر طراحی شد و روی سطح الکترود اصلاح شده قرار گرفت. این پژوهشگر ادامه داد: بعد از هیبریداسیون میان پروب و توالی هدف، پیک DPV حاصل اندازه‌گیری شد.
همچنین بهینه‌سازی فاکتورهای موثر بر پاسخ زیست حسگر شامل غلظت پروب، مدت زمان تثبیت پروب روی الکترود، مدت زمان هیبریداسیون و pH بافر هیبریداسیون انجام شد همچنین مشخصه‌یابی الکتروشیمیایی CV و مشخصه‌یابی‌های فیزیکی شامل تصویربرداریFESEM و AFM برای بررسی عملکرد زیست حسگر طراحی شده انجام شدند. کتابی گفت: نمونه‌های استفاده شده در این مطالعه شامل نمونه‌های بالینی و حاصل از کشت سلول توسط تست استاندارد طلایی تشخیص روتاویروس‌ها یعنی RT-PCR و همچنین با استفاده از زیست حسگر طراحی شده بررسی و از نظر اختصاصیت و حساسیت مورد مقایسه قرار گرفتند. همچنین پایداری و تکثیرپذیری DNA زیست حسگر طراحی شده نیز بررسی شد. وی با اشاره به نتایج این پژوهش گفت: بر اساس نتایج حاصل از این مطالعه،DNA زیست حسگر الکتروشیمیایی طراحی شده توانست در رنج خطی ۱۰-۷ تا ۱۰-۱۸ مولار و با کمترین حد تشخیصی ۰.۸ اتومولار وجود روتاویروس‌ها را در نمونه‌های مورد نظر تشخیص دهد. همچنین میزان LOD و رنج خطی تشخیص بر اساس PFU به ترتیب 123 PFU و105 PFU تا PFU 3333 محاسبه شد. لازم به ذکر است که این زیست حسگر قادر به افتراق توالی های DNA دارای بازهای غیرمکمل و توالی نامکمل از توالی هدف بود.
این پژوهشگر اضافه کرد: زیست حسگر الکتروشیمیایی ساخته شده با حساسیت و اختصاصیت بالا نسبت به RT-PCR که روش استاندارد طلایی تشخیص روتاویروس‌ها است، تکرارپذیری و تکثیرپذیری مناسب، رنج خطی وسیع و میزان LOD پایین، رویکرد تشخیصی جدیدی برای تشخیص روتا ویروس‌ها است این پژوهش در قالب رساله دکترای تخصصی کیانا کتابی با راهنمایی حوریه سلیمان‌جاهی عضو هیأت علمی دانشکده علوم پزشکی دانشگاه انجام شد. پایان پیام/.
14:29 - 11 دی 1402
2 بازنشر
108 بازدید
1 پاسخ